本ページのコーティング方法は、製品ごとの品質保証書を和訳したものです。
品質保証書は保証書のダウンロードからご利用いただけます。

溶解と取り扱い

HFNを適切に溶解するためには、必ずこの溶解の手順に従ってください。

バイアルを常温に戻します。1 mL（カタログ番号 354008の場合）もしくは5 mL（カタログ番号 356008の場合）の滅菌蒸留水を加えます。基質が溶けるまで30分待ちます。撹拌したり回転させたりしないでください。すぐに全量を使用しない場合は、適量に分注して-20℃で保存してください。溶解後は2週間以内に使用することをお奨めします。霜取り装置付き冷凍庫には保存しないでください。凍結融解を繰り返さないでください。

ヒト フィブロネクチンは一般的に、接着のためには培養表面に対して1～5 µg/cm²で、培地の添加剤としては5 µg/mLで使用されます。

コーティング方法：

下記は推奨です。個々の培養系に最適なコーティング条件を決めるためのガイドラインとしてご使用ください。

1. 「溶解と取り扱い」のとおりに、滅菌蒸留水を用いて溶解します。

2. 続いて、カルシウムイオン、マグネシウムイオンフリーの無血清培地またはpH7～9の緩衝液を用いて、フィブロネクチンを希望の濃度に希釈します。表面をまんべんなくコーティングできるように最終溶液量を調製してください。

例）最終のコーティング濃度が5 µg/cm²の場合、基質を50 µg/mLに希釈し、35 mmディッシュには1 mL、60 mmディッシュには3 mL 添加してください。

注意：調製したHFN溶液にはCAPSの成分が含まれており、カルシウムイオンと/またはマグネシウムが入った緩衝液や培地を用いると、不溶性の金属水酸化物を形成することがあります。希釈液の緩衝能がpHを8以下に下げるものであれば、これは起こりません。

3. 培養表面に希釈した基質を適量添加してください。

4. 室温で1時間インキュベートします。

5. 残った基質を吸引してください。

6. 滅菌蒸留水で穏やかにリンスします。底面をひっかいてしまわないように気を付けてください。

7. プレートはすぐに使用することができます。滅菌状態が維持されれば、2～8℃で、乾湿いずれでも保管することができます。