Cultura de Células Aderentes em Escala: Transição para Recipientes Maiores
Para muitos grupos de pesquisa, o primeiro passo na escalonamento envolverá a transição de um frasco T-150 típico para um recipiente maior, como os frascos CellSTACK®, HYPERFlask® ou HYPERStack® da Corning®. As câmaras de cultura CellSTACK estão disponíveis em tamanhos de 1, 2, 5, 10 e 40 camadas, com até 25.440 cm² de área de crescimento. Todos os CellSTACKs podem ser convertidos em sistemas fechados usando uma variedade de tampas e tubos de sistema fechado oferecidos pela Corning. A transição para um sistema fechado facilitará a transição para a Boas Práticas de Fabricação (BPF), que é essencial para a fase de produção.
Os frascos HYPERFlask e HYPERStack da Corning utilizam um filme inovador permeável a gás para oferecer soluções mais compactas. Esses recipientes possuem uma camada externa de poliestireno rígido, mas a superfície de crescimento é de poliestireno ultrafino que permite a troca de gases. O HYPERFlask é semelhante a um frasco T-175 tradicional em tamanho e formato geral, mas possui 10 camadas de poliestireno ultrafino, oferecendo 1.720 cm² de área de crescimento. O HYPERFlask está disponível para manuseio manual ou automatizado.
Os recipientes HYPERStack já saem da embalagem como um sistema fechado e estão disponíveis com 12 ou 36 camadas, oferecendo 6.000 ou 18.000 cm² de superfície de crescimento, respectivamente. A área ocupada por um recipiente HYPERStack é semelhante à de uma câmara CellSTACK, mas o HYPERStack-36 tem apenas 28 cm de altura, em comparação com o CellSTACK-40, que tem 72 cm de altura. Para reduzir o tempo de manuseio, os recipientes HYPERStack podem ser unidos com manifolds descartáveis. Um manifold de cinco braços pode ser usado para unir pilhas de quatro recipientes HYPERStack-36.
Para facilitar a manipulação de líquidos e melhorar a consistência, a plataforma de manipulação automatizada da Corning pode suportar seis recipientes HYPERStack-36, totalizando 108.000 cm² (ou 10,8 m²) de área de crescimento. Alternativamente, ela pode suportar três câmaras CellSTACK-40, totalizando 76.320 cm² (ou 7,632 m²) de área de crescimento.
Garantindo a Compatibilidade no Início do Escalonamento da Cultura de Células Aderentes
O uso de recipiente CellSTACK, HYPERFlask e HYPERStack requer mudanças relativamente modestas nas técnicas tradicionais de cultura de células 2D. Embora alguma verificação e modificação sejam necessárias à medida que a escala de produção aumenta, o processo tende a ser bastante direto, sendo uma boa escolha quando o tempo de desenvolvimento do processo é limitado. Na fase de pesquisa e desenvolvimento, as células são geralmente cultivadas em uma superfície de poliestireno 2D tratada para cultura de tecidos e possivelmente revestida adicionalmente para promover a adesão celular. No início do processo de pesquisa, verifique se os revestimentos de superfície, as células, o meio de cultura e os componentes adicionais (incluindo meio, soro e suplementos) que estão sendo usados são compatíveis com as etapas posteriores do processo, incluindo ensaios clínicos. Além disso, considere como as células ou produtos celulares estão sendo colhidos. Se forem necessárias quaisquer alterações, considere fazê-las o mais cedo possível.
