Corningスフェロイドマイクロプレートの独自の丸底デザインは、1つの均一なスフェロイドを形成でき、各ウェルの真ん中に位置させることができます。この技術は3Dスクリーニングにおいて信頼できるツールです。
平底ウェルでは、複数の不均一なサイズのスフェロイドが各ウェルの不均一な場所に形成され、ウェル間の再現性はありません。ウェル間のばらつきにより、ハイスループットスクリーニングには適していません。
培地交換では、使用した培地をウェルから取り除き新しい培地と交換する必要があります。スフェロイドを崩さないために、培地交換はウェルの中心を避け、ウェルの端を使って、培地の吸引と添加を行うことをお勧めします。
最も容易な方法は培地の半量交換です。例えば、1ウェルあたり200µLで培養した96ウェルフォーマットの50%の培地を除去するには、100µLの使用済み培地を吸引し、100µLの新しい培地を加えます。
培地の全量交換、またはウォッシュステップでは96ウェルでも384ウェルでも1ウェルあたり最低10µLを残すことをお勧めします。プレート寸法表をもとに、ウェルボトムから2mmから3mm上、少し中心から外れた場所にリキッドハンドリンク装置が来るようにプログラムを組んでください。
いいえ。蒸発は問題になりません。なぜならスフェロイドはウェルの中に形成されるからです。長期培養、
特に384ウェルでは、通気性シーリングテープ(Corning Cat.No.3345)を使うことをお勧めします。
メーカー機器名称
BioTekR Instruments, Inc. CytationR cell imaging multi-mode reader
Essen Bioscience IncuCyte ZOOMR
Molecular Devices ImageXpressR Micro XLS automated imaging system
Nexcelom CeligoR S image cytometer
TTP Labtech AcumenR Cellista laser scanning image cytometer
いいえ。Corningスフェロイドマイクロプレートは特にアッセイ用にデザインされています。
プレートは透明な丸底ウェルと黒い本体から構成されています。さらにウェル間のクロストークを抑える独自のウェル壁があります。
細胞増殖と細胞毒性アッセイスクリーニングには、Promega CellTiter-GloR 3D Cell Viability Assayを使用することをお勧めします。