FAQ 構成の詳細
どのように Corning® PureCoatTM rLaminin-521 カルチャーウェアは製造していますか?
Corning PureCoat rLaminin-521 セルカルチャーウェアは、独自のコーティング技術を使用して製造しております。リコンビナントLaminin-521 は受動的に表面に結合しています。
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Corning PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアの "アニマルフリー" とはどのような定義ですか?
製品に動物由来のものが含まれていないということです。
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Corning PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアの保管条件は?
PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアは、室温輸送ですが、保管は2 ~ 8℃になります。
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パッケージを開封後、容器はどのくらいの期間で使用すればよいでしょうか?
パッケージ開封後は、すぐに使用してください。
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この製品の有効期限はどのくらいですか?
2 ~ 8℃の保存で製造から20 ヶ月です。
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パッケージを開封してしまったら、有効期限はどうなりますか?
有効期限は未開封時のものです。一度開封したら、すぐに使用してください。
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PureCoat rLaminin-521 は、使用前に洗浄する必要はありますか?
PureCoat rLaminin-521 は、すぐに使用が可能です。使用前の洗浄は必要ありません。使用するまでパッケージは開封しないでおいてください。
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PureCoat rLaminin-521 は、使用前に水和する必要はありますか?

<重要な手順>  

PureCoat rLaminin-521 は、使用直前に水和する必要があります。細胞を播種する直前にプロトコールに従って使用する培地を必要量容器に添加して、37℃、5%CO2 インキュベーターで、30 分から1 時間水和してください。

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PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアの一度では使用しきれなかった未使用ウェルを使用することはできますか?
未使用ウェルの製品安定性と滅菌性に関して保証できませんので、次の実験には新しいプレートをご使用いただくことを推奨します。
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Corning PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアではどのような細胞を培養したことがありますか?
PureCoat rLaminin-521 上で、ヒト多能性幹細胞(hPSCs)とヒト神経幹細胞(hNSCs)の培養実績はあります。ヒト人工多能性幹細胞(hiPSCs)の誘導 / 樹立、網膜色素上皮細胞(RPE)の培養やhNSCs の分化にも使用されています。
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推奨するhPSCs 培養用培地は何ですか?
mTeSRTM 1(STEMCELL Technologies)、NutriStem® XF/FF culture medium(Stemgent)、StemMACSTM iPS-Brew XF(Miltenyi Biotec)、XVIVOTM 10(with supplements; Lonza)とE8 medium (Thermo Fisher Scientific または STEMCELL Technologies)が、PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアと使用できます。
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推奨するhNSCs 培養用培地は何ですか?
ヒト神経幹細胞は、StemPro® NSC SFM(Thermo Fisher Scientific)で培養できます。
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Corning PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアには、細胞はどのくらいで接着しますか?

<重要な手順> 

細胞は30 秒ほどでPureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアに接着し始めます。細胞浮遊液がよく懸濁され、浮遊液を容器に入れてすぐに培養表面に均一に細胞分散していることが必須となります。

 

6 ウェルプレートは、各ウェルに細胞が均一に分散するように細胞浮遊液をドロップ状に添加し、すぐにプレートを優しくゆすってください。

 

フラスコは、細胞浮遊液を添加する時には垂直にしたまま操作してください。添加後、フラスコを倒してすぐに横と縦に揺らして、細胞が均一に分散するようにしてください。インキュベーターに、フラスコを入れる前にこの作業を行う必要があります。

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PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェア上で培養したhPSCs の形状は、他のフィーダーフリーの基質(例:Corning マトリゲル基底膜マトリックス)で培養した場合と似ていますか?
PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェア表面に接着したすぐ後のhPSCs の形状は少し異なります。播種後、3 ~ 4 日までは細胞は少し大きくて、コンパクトではないですが、4 ~ 5 日後には典型的な目立った核、小さいサイズの細胞、高い核/ 細胞質比のhPSC 形状になります。
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PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェア上に融解後の細胞を播種してもいいですか?
細胞は融解後、直接PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアにクランプ状でもシングルセルでも播種することができます。異なる培地と容器の組み合わせで培養していた細胞を凍結から起こす場合は、順化のステップが必要になることがあります。細胞は、以前使用していた基質上で起こして、その後PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアに継代する必要がある場合があります。
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Corning PureCoat rLaminin-521 で培養したhPSCs は、どのような方法で継代すればいいでしょうか?
PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアで培養したhPSCs は、シングルセルでの継代をお勧めしますが、クランプでの継代も成功しています。
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Corning PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアで培養したhPSCs のシングルセルでの継代時の推奨播種数はありますか?
シングルセル継代の場合は、hPSCs を50,000 cells/cm2 で播種することをお勧めしていますが、使用しているhPSC 株と使用している培地で、播種密度の最適化を行う事をお勧めいたします。
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Corning PureCoat rLaminin-521 上で培養したhPSCs のシングルセル継代に推奨する細胞剥離剤はありますか?
PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアを使用した際のシングルセル継代には、AccutaseTMを推奨します。
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Corning PureCoat rLaminin-521 上で培養したhPSCs のシングルセル継代には、Rock inhibitor のような低分子の添加は必要ですか?
PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェア上でシングルセル継代をする際にはRock inhibitorのような低分子の添加は不要です。
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hPSCs のシングルセル継代の最適な継代時期はいつですか?
継代のタイミングは、培養条件によって最適化する必要があります。通常は、継代から4~8日の間で、80%くらいのコンフルエントになった時が適しています。
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Corning PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアで試したhPSCs のクランプ継代はどのような方法を使用しますか?
EDTA ベースの細胞剥離剤を使用して、PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェア上でクランプ継代を行う事を推奨します。代替法としては、滅菌済みセルスクレーパーやチップを用いて、機械的に継代することも可能です。ディスパーゼを使用することはお奨めしておりません。
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以前、他の基質で培養したhPSCs をCorning PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェア上で培養する場合には、順応する時間が必要ですか?
細胞は、PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェア上で、すぐに培養することができます。ヒトPSCs は、PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアに順応するのに3 継代ほどかかるかもしれません。
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本製品は、cGMP 環境で製造していますか?
PureCoat rLaminin-521 は、The EN ISO 9001 Standard, the EN ISO 13485 Standard とFDA CFR 21 Part 820, current Good Manufacturing Practices(cGMP)を取得した施設で製造しています。
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この製品の品質管理を教えてください。

ノンパイロジェニック:United States Pharmacopeia(USP) Chapter <85>, "Bacterial Endotoxins Test" に基づいた基準に適合した製品テストをおこなっています。許容レベルは、≦ 0.5EU/mL、または≦ 20EU/device になります。

 

機能性:Corning PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアは、ヒトiPS 細胞の無血清培地での接着、増殖、シングルセルでの継代を確認しています。



滅菌性:Corning PureCoat rLaminin-521 カルチャーウェアは、ISO 13408-1, "Aseptic Processing of Healthcare Products" とUSP <71> "Sterility tests" に準拠した滅菌プロセスを使用して製造しています。各ステップは、すべての製品が業界基準のSterility Assurance Level( SAL): 10-3 を満たしていることを確認しています。